公卫·科普 | 大揭秘!新冠病毒核酸实验室检测流

在疫情期间，核酸检测已成为大家生活中被常常提及的一个词汇。核酸检测由于具有早期诊断、灵敏度和特异度高等特点，在新冠病毒肺炎诊断和防治过程中发挥了重要作用。那么核酸检测在实验室中具体是如何开展的呢?大家有可能还不是很了解，今天和大家聊聊在实验室中进行新型冠状病毒核酸检测的那些事。新冠病毒的核酸检测有很多检测方法，在常规实验室中主要采用的实时荧光PCR技术进行检测，其检测过程中主要分为以下步骤:#样本采集医护人员用病毒保存管配套的棉签在患者的咽喉处擦拭，收集到混合着细菌、病毒、人体细胞的分泌物样本。然后将棉签样本转移到专用含病毒保存液的采样管中。经过病毒采样管、专用样本运送袋、密封样本转运箱，层层包裹之后，由专人专车送到检测实验室。#样本灭活拆开样本包装，对外包装逐层喷洒酒精进行消毒，然后对样本进行标签收登记。将病毒采样管放入温箱中进行56℃30分钟热灭活或其他途径进行病毒灭活。经灭活的样本，理论上不具备传播活性，病毒核酸未过度破获仍可被检出。#病毒核酸提取新冠病毒核酸检测通常采用基于磁珠法抽提原理的自动核酸提取仪。磁珠法中的细胞裂解液是一种蛋白质变性剂，可使得细菌、病毒裂解，并使与核酸结合的蛋白质变性。核酸游离释放后，磁珠可以特异地吸附核酸，通过洗涤，去除核酸以外的蛋白质、多糖等杂质，再用洗脱液解离吸附在磁珠上的核酸，最终得到纯度和浓度均很高的核酸，可用于PCR扩增检测。该过程需在特定PCR实验室的样本处理区域(2区)进行，工作人员需在三级生物安全防护条件下开展实验。通常一批次样本核酸提取全过程需要2-3小时。#核酸扩增将抽提好的病毒核酸加入提前配制好的反应体系中，采用实时荧光PCR(聚合酶链式反应)技术及扩增设备，在PCR实验室的扩增区(3区)进行扩增检测。通过PCR程序的放大效应，病毒核酸中的目的基因片段被扩增，荧光信号随反应循环被放大，最终通过分析荧光信号曲线获得样本的检测结果。此过程时间依检测试剂而不同，通常扩增全过程需要80-120分钟。#结果分析通过扩增仪器软件对试验阴阳性质控进行初步分析，满足要求后对各通道靶基因荧光曲线及对照荧光曲线进行综合分析，保证每个样本抽提扩增参数有效后最终确定新冠核酸检测结果。对于曲线参数不符合要求或结果异常样本及时开展复测。#结果解读结果阴性表明本次检测核酸样本中无新型冠状病毒基因物质。需注意的是，核酸检测结果阴性不能完全排除新型冠状病毒感染。可能产生假阴性的因素包括:样本采集质量差，没有正确的保存、运输、处理样本，病毒变异，PCR抑制等原因。此外还有检测试剂灵敏度不足的问题。以上就是大家常说的“核酸检测”实验室全过程，是不是过程有点复杂?从采样到出结果全过程约4-6小时。公卫中心检验医学科基因扩增室每天检测新冠病毒核酸两批次，上午10:15以前送达的标本，下午3点前出报告;下午4点前送达的标本，晚上10:00前出报告。如有新冠核酸检测需求的市民可来公卫中心咨询检测，我们将竭诚为您服务!检验医学科-基因扩增组

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